Microscoop Mint 超高分辨原位空間蛋白捕獲系統(tǒng)
無需抗體panel標記
對亞細胞蛋白質(zhì)進行光生物素化標記
用質(zhì)譜進行無偏的蛋白質(zhì)組鑒定
高分辨率、高靈敏度和高特異性
不限物種，適用于各類細胞和組織樣本
詳情
產(chǎn)品簡介
Microscoop? Mint是一款突破性的空間蛋白質(zhì)組學平臺，已被用于揭示許多生物學問題中感興趣的特定細胞/亞細胞區(qū)域內(nèi)新的蛋白質(zhì)組成。Microscoop? Mint執(zhí)行顯微“挖掘”操作，即通過自動化的雙光子激光引導的光生物素化標記，以對AI圈選的目標區(qū)域內(nèi)足夠多的細胞/亞細胞蛋白質(zhì)進行光標記和分離/采集，然后通過質(zhì)譜檢測實現(xiàn)空間蛋白質(zhì)組學新的發(fā)現(xiàn)。這是一種前所未有的空間捕獲技術(shù)，能夠在高分辨率、高靈敏度和高特異性下實現(xiàn)無偏的細胞/亞細胞蛋白質(zhì)組鑒定，并能夠從目標區(qū)域中準確發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)成分。
產(chǎn)品工作流程
1、第1步：實時圖像分析：向樣本中加入光標記試劑（Synlight-RichTM或Synlight-PureTM）進行孵育；對樣本進行成像（可實現(xiàn)多個顏色成像），用AutoscoopTM軟件進行實時分析，結(jié)合AI技術(shù)圈選感興趣區(qū)域。
2、第2步：光生物素化標記：雙光子激光受控制的在感興趣的區(qū)域內(nèi)進行逐個視野地掃射；通過激活光標記試劑（Synlight-RichTM或Synlight-PureTM）中可活化的生物素標簽，實現(xiàn)空間定位精準的蛋白質(zhì)光生物素化標記；該光標記過程會自動在數(shù)千個視野范圍內(nèi)重復進行，以確保有足夠數(shù)量的蛋白質(zhì)被生物素標記，用于后續(xù)基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學分析。
3、第3步：蛋白質(zhì)提?。菏占瘶悠方M織，使用蛋白提取試劑（SynpullTM）處理，以裂解樣品，通過鏈霉親和素磁珠免疫沉淀富集光標記的蛋白，并將其消化為肽段用于后續(xù)質(zhì)譜檢測。
4、第4步：蛋白質(zhì)組鑒定：收集的肽段被送入質(zhì)譜儀進行 LC-MS/MS 分析；通過對比光標記組和對照組的蛋白質(zhì)，可高靈敏度、高特異性、高空間精度地獲得目標區(qū)域的特異性蛋白質(zhì)組信息；后續(xù)可通過免疫染色共定位或附加功能實驗進行蛋白質(zhì)的驗證?？蓪崿F(xiàn)納米分辨率的無偏的細胞/亞細胞空間蛋白質(zhì)組鑒定，并能夠從目標區(qū)域中準確發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)成分。
產(chǎn)品特點
1、無偏的蛋白質(zhì)組鑒定：無需事先設(shè)計檢測panel即可鑒定蛋白質(zhì)組；
2、可發(fā)現(xiàn)高特異性的新的蛋白質(zhì)成分：質(zhì)譜檢測可發(fā)現(xiàn)新成分；
3、高分辨率標記：光生物素標記的精度達到25nm，可標記亞細胞蛋白質(zhì)，匹配蛋白質(zhì)的空間信息；
4、高檢測靈敏度：高動態(tài)范圍，可發(fā)現(xiàn)低拷貝數(shù)蛋白質(zhì)；
5、廣泛的樣本兼容性：適用于FFPE、新鮮冰凍組織、固定冰凍組織、固定細胞等組織和細胞樣本；
6、無需進行分子修飾，在原始的細胞或組織環(huán)境中進行空間蛋白質(zhì)組檢測。
應(yīng)用概述
Microscoop Mint可用于廣泛的研究領(lǐng)域，包括：神經(jīng)科學、癌癥生物學、細胞生物學、免疫學、發(fā)育生物學、傳染病、衰老、代謝性疾病、炎癥性疾病、干細胞研究、免疫腫瘤學、病理學、藥物靶點發(fā)現(xiàn)、生物標志物發(fā)現(xiàn)等領(lǐng)域。
應(yīng)用展示
1、神經(jīng)科學
顯微鏡可識別的結(jié)構(gòu)，如β淀粉樣蛋白、內(nèi)側(cè)內(nèi)嗅皮層 II 層中 reelin 陽性神經(jīng)元或樹突棘等，可通過Microscoop? 實現(xiàn)的空間富集技術(shù)進行研究。以下是海馬齒狀回苔蘚纖維末梢的一個示例，通過Microscoop?（Alexa488- 中性鏈霉親和素，綠色）進行光生物素標記，用于后續(xù)蛋白質(zhì)提取及蛋白質(zhì)組發(fā)現(xiàn)研究。
2、癌癥生物學
通過 Microscoop? 實現(xiàn)的空間富集技術(shù)以及后續(xù)的蛋白質(zhì)組學分析，可以解決諸如識別轉(zhuǎn)移細胞的E- 鈣粘蛋白相關(guān)蛋白、癌細胞與 T 細胞界面處的蛋白，以及三陰性乳腺癌中 Ki67+ 細胞的蛋白質(zhì)組等問題。以下是一個早期癌癥標志物角蛋白 19 細胞在小鼠胰腺癌病灶周圍分布的示例。
3、細胞生物學
利用 Microscoop? 和質(zhì)譜技術(shù)可以鑒定細胞器等亞細胞結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)組，例如較大的細胞外囊泡、應(yīng)激顆粒、絲狀偽足尖端、局灶性粘附或內(nèi)質(zhì)網(wǎng) - 線粒體接觸位點。此處展示了一個例子：過氧化物酶體（PEX14，綠色），可通過 Microscoop? 進行光生物素化標記，用于亞細胞空間捕獲和蛋白質(zhì)組學分析。
4、代謝生物學
利用 Microscoop? 技術(shù)進行蛋白質(zhì)組學發(fā)現(xiàn)還可以應(yīng)用于免疫學、代謝疾病、發(fā)育生物學、傳染病等其他生物學問題的研究。這是一張胰島的圖像，可以從中分離出α細胞（胰高血糖素，綠色）、β細胞（胰島素，白色）或血管（WGA，紅色），并鑒定新的蛋白質(zhì)成分。
