Microscoop Mint 超高分辨原位空間蛋白捕獲系統(tǒng)
無需抗體panel標(biāo)記
對(duì)亞細(xì)胞蛋白質(zhì)進(jìn)行光生物素化標(biāo)記
用質(zhì)譜進(jìn)行無偏的蛋白質(zhì)組鑒定
高分辨率、高靈敏度和高特異性
不限物種,適用于各類細(xì)胞和組織樣本
詳情
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Microscoop? Mint是一款突破性的空間蛋白質(zhì)組學(xué)平臺(tái),已被用于揭示許多生物學(xué)問題中感興趣的特定細(xì)胞/亞細(xì)胞區(qū)域內(nèi)新的蛋白質(zhì)組成。Microscoop? Mint執(zhí)行顯微“挖掘”操作,即通過自動(dòng)化的雙光子激光引導(dǎo)的光生物素化標(biāo)記,以對(duì)AI圈選的目標(biāo)區(qū)域內(nèi)足夠多的細(xì)胞/亞細(xì)胞蛋白質(zhì)進(jìn)行光標(biāo)記和分離/采集,然后通過質(zhì)譜檢測(cè)實(shí)現(xiàn)空間蛋白質(zhì)組學(xué)新的發(fā)現(xiàn)。這是一種前所未有的空間捕獲技術(shù),能夠在高分辨率、高靈敏度和高特異性下實(shí)現(xiàn)無偏的細(xì)胞/亞細(xì)胞蛋白質(zhì)組鑒定,并能夠從目標(biāo)區(qū)域中準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)成分。

產(chǎn)品工作流程
1、第1步:實(shí)時(shí)圖像分析:向樣本中加入光標(biāo)記試劑(Synlight-RichTM或Synlight-PureTM)進(jìn)行孵育;對(duì)樣本進(jìn)行成像(可實(shí)現(xiàn)多個(gè)顏色成像),用AutoscoopTM軟件進(jìn)行實(shí)時(shí)分析,結(jié)合AI技術(shù)圈選感興趣區(qū)域。
2、第2步:光生物素化標(biāo)記:雙光子激光受控制的在感興趣的區(qū)域內(nèi)進(jìn)行逐個(gè)視野地掃射;通過激活光標(biāo)記試劑(Synlight-RichTM或Synlight-PureTM)中可活化的生物素標(biāo)簽,實(shí)現(xiàn)空間定位精準(zhǔn)的蛋白質(zhì)光生物素化標(biāo)記;該光標(biāo)記過程會(huì)自動(dòng)在數(shù)千個(gè)視野范圍內(nèi)重復(fù)進(jìn)行,以確保有足夠數(shù)量的蛋白質(zhì)被生物素標(biāo)記,用于后續(xù)基于質(zhì)譜技術(shù)的蛋白質(zhì)組學(xué)分析。
3、第3步:蛋白質(zhì)提?。菏占瘶悠方M織,使用蛋白提取試劑(SynpullTM)處理,以裂解樣品,通過鏈霉親和素磁珠免疫沉淀富集光標(biāo)記的蛋白,并將其消化為肽段用于后續(xù)質(zhì)譜檢測(cè)。
4、第4步:蛋白質(zhì)組鑒定:收集的肽段被送入質(zhì)譜儀進(jìn)行 LC-MS/MS 分析;通過對(duì)比光標(biāo)記組和對(duì)照組的蛋白質(zhì),可高靈敏度、高特異性、高空間精度地獲得目標(biāo)區(qū)域的特異性蛋白質(zhì)組信息;后續(xù)可通過免疫染色共定位或附加功能實(shí)驗(yàn)進(jìn)行蛋白質(zhì)的驗(yàn)證??蓪?shí)現(xiàn)納米分辨率的無偏的細(xì)胞/亞細(xì)胞空間蛋白質(zhì)組鑒定,并能夠從目標(biāo)區(qū)域中準(zhǔn)確發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)成分。

產(chǎn)品特點(diǎn)
1、無偏的蛋白質(zhì)組鑒定:無需事先設(shè)計(jì)檢測(cè)panel即可鑒定蛋白質(zhì)組;
2、可發(fā)現(xiàn)高特異性的新的蛋白質(zhì)成分:質(zhì)譜檢測(cè)可發(fā)現(xiàn)新成分;
3、高分辨率標(biāo)記:光生物素標(biāo)記的精度達(dá)到25nm,可標(biāo)記亞細(xì)胞蛋白質(zhì),匹配蛋白質(zhì)的空間信息;
4、高檢測(cè)靈敏度:高動(dòng)態(tài)范圍,可發(fā)現(xiàn)低拷貝數(shù)蛋白質(zhì);
5、廣泛的樣本兼容性:適用于FFPE、新鮮冰凍組織、固定冰凍組織、固定細(xì)胞等組織和細(xì)胞樣本;
6、無需進(jìn)行分子修飾,在原始的細(xì)胞或組織環(huán)境中進(jìn)行空間蛋白質(zhì)組檢測(cè);
7、不限物種,適用于各類細(xì)胞和組織樣本。
應(yīng)用概述
Microscoop Mint可用于廣泛的研究領(lǐng)域,包括:神經(jīng)科學(xué)、癌癥生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、傳染病、衰老、代謝性疾病、炎癥性疾病、干細(xì)胞研究、免疫腫瘤學(xué)、病理學(xué)、藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)、生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)等領(lǐng)域。

應(yīng)用展示
1、神經(jīng)科學(xué)
顯微鏡可識(shí)別的結(jié)構(gòu),如β淀粉樣蛋白、內(nèi)側(cè)內(nèi)嗅皮層 II 層中 reelin 陽性神經(jīng)元或樹突棘等,可通過Microscoop? 實(shí)現(xiàn)的空間富集技術(shù)進(jìn)行研究。以下是海馬齒狀回苔蘚纖維末梢的一個(gè)示例,通過Microscoop?(Alexa488- 中性鏈霉親和素,綠色)進(jìn)行光生物素標(biāo)記,用于后續(xù)蛋白質(zhì)提取及蛋白質(zhì)組發(fā)現(xiàn)研究。

2、癌癥生物學(xué)
通過 Microscoop? 實(shí)現(xiàn)的空間富集技術(shù)以及后續(xù)的蛋白質(zhì)組學(xué)分析,可以解決諸如識(shí)別轉(zhuǎn)移細(xì)胞的E- 鈣粘蛋白相關(guān)蛋白、癌細(xì)胞與 T 細(xì)胞界面處的蛋白,以及三陰性乳腺癌中 Ki67+ 細(xì)胞的蛋白質(zhì)組等問題。以下是一個(gè)早期癌癥標(biāo)志物角蛋白 19 細(xì)胞在小鼠胰腺癌病灶周圍分布的示例。

3、細(xì)胞生物學(xué)
利用 Microscoop? 和質(zhì)譜技術(shù)可以鑒定細(xì)胞器等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)組,例如較大的細(xì)胞外囊泡、應(yīng)激顆粒、絲狀偽足尖端、局灶性粘附或內(nèi)質(zhì)網(wǎng) - 線粒體接觸位點(diǎn)。此處展示了一個(gè)例子:過氧化物酶體(PEX14,綠色),可通過 Microscoop? 進(jìn)行光生物素化標(biāo)記,用于亞細(xì)胞空間捕獲和蛋白質(zhì)組學(xué)分析。

4、代謝生物學(xué)
利用 Microscoop? 技術(shù)進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)發(fā)現(xiàn)還可以應(yīng)用于免疫學(xué)、代謝疾病、發(fā)育生物學(xué)、傳染病等其他生物學(xué)問題的研究。這是一張胰島的圖像,可以從中分離出α細(xì)胞(胰高血糖素,綠色)、β細(xì)胞(胰島素,白色)或血管(WGA,紅色),并鑒定新的蛋白質(zhì)成分。

